果蠅是遺傳學(xué)研究中常用的模式生物之一,是生物學(xué)研究中的重要材料。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,現(xiàn)代遺傳學(xué)研究中很多都需要提取果蠅的DNA以及RNA。果蠅是屬于昆蟲綱雙翅目,形態(tài)上也非常接近,那么應(yīng)該如何提取果蠅的DNA及RNA呢?
從果蠅幼蟲或成蟲頭中分離RNA似乎有點(diǎn)困難,主要是由于角質(zhì)層的存在。角質(zhì)層是一種保護(hù)性外骨骼,由不溶性膠原蛋白、糖蛋白和脂質(zhì)等組成。雖然去除角質(zhì)層可能需要一些力,但可以很容易地做到這一點(diǎn),而且不會影響RNA的產(chǎn)量或純度。
提取RNA最主要的敵人是RNase(核糖核酸酶),它可能會悄悄消化掉所有的RNA。RNase是無處不在的,可能在你的手上、頭發(fā)上、衣服上,等等。在開始RNase消化掉任何RNA之前,用研磨儀直接將果蠅部分組織進(jìn)行濕磨,確保RNA不會流失。
上海凈信的工程師為此來到了華中科技大學(xué)生命科學(xué)院,和專門從事果蠅研究的老師進(jìn)行了一場關(guān)于“提取果蠅(昆蟲)DNA解決方案”的相關(guān)性實(shí)驗(yàn)
張珞穎課題組
研究方向:
(1)研究人類突變影響睡眠或晝夜節(jié)律的機(jī)理;
(2)挖掘和鑒定新的睡眠基因和生物鐘基因,研究其調(diào)控睡眠或晝夜節(jié)律的機(jī)理;
(3)研究睡眠和生物鐘對情緒、學(xué)習(xí)記憶、新陳代謝等生命過程的影響及調(diào)節(jié)機(jī)理,從而探索睡眠和生物鐘的功能。
主要研究動物:果蠅
實(shí)驗(yàn)操作:2ml離心管,常溫,研磨珠:3mm氧化鋯鋼珠2倍標(biāo)本體積;按照要求調(diào)整好參數(shù)
研磨儀安裝調(diào)試完畢顯微操作取果蠅頭部
樣品的準(zhǔn)備(圖1)放入研磨珠(圖2)
最終研磨效果,均勻細(xì)膩
此實(shí)驗(yàn)方法為濕磨方法,經(jīng)后續(xù)DNA、RNA實(shí)驗(yàn)檢測效果非常好。