實驗目的:本次實驗需要蛋白純化,要求除去其中混有的PBS緩沖液,以提高蛋白的濃度,故選用冷凍真空冷凍離心濃縮儀(JX-ZLN-B)對樣品進行低溫濃縮,在保護樣品的同時使用戶獲得優(yōu)質效果。
樣品介紹:
蛋白質是包括人類在內(nèi)的各種生物有機體的重要組成成分,是生命的物質基礎之一。隨著分子生物學、結構生物學、基因組學等研究的不斷深入,人們意識到僅僅依靠基因組的序列分析來試圖闡明生命活動的現(xiàn)象和本質是遠遠不夠的。許多學者將生命科學領域的研究焦點從基因轉向蛋白質。
研究蛋白質首要的步驟是將目的蛋白從復雜的大分子混合物中分離純化出來,得到高純度具有生物學活性的目的物。因此,高效的純化技術和手段是蛋白質研究的重要基礎和關鍵之一。
實驗設備:
冷凍真空冷凍離心濃縮儀(JX-ZLN-B)
實驗過程:
1、設置所需冷阱溫度-65℃,點擊“制冷”按鈕,提前預冷
2、在“參數(shù)設置”處,按要求依次設置速度,時間和溫度。選定需要的程序,點擊“溫度設置”開始提前加熱
3、待主機預熱溫度和冷阱預冷溫度達到所設置的參數(shù),即可將配置好的10ml的樣品放置濃縮儀進行配比,注意管口為開口狀態(tài),點擊“START”開始運行
4、設備運行過程中,可用頻閃儀觀察溶液濃縮情況,實時控制實驗進度
5、設備運行結束時,轉子停止運行后,蜂鳴器發(fā)出提示音,此時便可取出離心管獲取所需濃縮樣品
6、關閉冷阱,開始除霜回收冷阱中的溶劑。
實驗結果:
樣品研磨前后效果圖
需要蛋白純化,要求除去其中混有的PBS緩沖液,以提高蛋白的濃度。蛋白純化需要獲得高純度、活性和產(chǎn)量的蛋白質。冷凍真空離心濃縮儀采用離心力、真空和加熱相結合的方法使樣品中的溶劑快速蒸發(fā),從而達到濃縮樣品的目的。低溫濃縮,使樣品更安全。廣泛應用于蛋白和分子結構實驗室。